1.臨床薬理試験

アジルサルタンはアンジオテンシンⅡタイプ1（AT₁）受容体に結合してアンジオテンシンⅡと拮抗し、主にその強力な血管収縮作用を抑制することによって生ずる末梢血管抵抗の低下により降圧作用を示す。

（1）アンジオテンシンⅡによる昇圧効果に対する影響（海外データ）^23）

健康成人男子を対象にアンジオテンシンⅡ負荷条件下でアジルサルタン0.3～20mgを単回投与したときの臥位収縮期血圧及び拡張期血圧の昇圧抑制率の推移を検討した。アンジオテンシンⅡ昇圧反応に対するアジルサルタンの抑制作用は以下のとおりで、アジルサルタン20mg投与時の収縮期血圧及び拡張期血圧の昇圧反応に対する抑制率は、32時間後でそれぞれ55％及び74% であった。

［試験方法］

対　　象	：	健康成人男子（8例）
試験方法	：	アジルサルタン0.3mg、1mg、5mg、20mg及びプラセボを単回漸増投与した。投与後0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、9、24及び32時間後にアンジオテンシンⅡを静脈内投与した。

（2）レニン―アンジオテンシン系に及ぼす影響^14）

健康成人男子にアジルサルタン20mg又は40mgを1日1回、7日間反復投与したとき、血漿中レニン活性、血漿中アンジオテンシンⅠ濃度及び血漿中アンジオテンシンⅡ濃度の増加が認められた。

［試験方法］

対　　象	：	健康成人男子（33例）
試験方法	：	アジルサルタン20mg、40mg又はプラセボを朝食後に1日1回、7日間反復投与した。

2.非臨床試験

（1）AT₁受容体に対する阻害作用（in vitro）^{24, 25）}

アジルサルタンは［¹²⁵I］−Sar¹−Ile⁸−AⅡのヒトAT₁受容体への特異的結合を濃度依存的に抑制し、そのIC₅₀値は0.62～2.6nmol/Lであった。なお、アジルサルタン代謝物M−I及びM−ⅡのAⅡ受容体結合阻害作用のIC₅₀値はそれぞれ2.3及び1.1μmol/Lであり、いずれも阻害活性はアジルサルタンの約1/1000であった。

［試験方法］

ヒトAT₁受容体に対するアジルサルタンの阻害作用は、well当たり1.6～2.3 fmolesの受容体を含むヒトAT₁受容体発現細胞膜をコーティングしたマイクロプレートを用いて行った。ヒトAT₁受容体発現細胞膜は種々の濃度の薬物を含むアッセイ緩衝液（50mmol/L Tris−HCl、5mmol/L MgCl₂、1mmol/L EDTA、pH7.4）で室温にてインキュベートした。90分後に［¹²⁵I］−Sar¹−Ile⁸−AⅡ（最終濃度0.6nmol/L）を添加し、さらに120分間室温でインキュベートした。細胞膜に結合した放射活性はマイクロプレート用シンチレーションカウンターで計測した。非特異的結合は10μmol/LのAⅡ存在下での放射活性から求め、特異的結合は総放射活性から非特異的結合を差し引いて求めた。

（2）AT₁受容体結合作用の薬物洗浄後の持続性（in vitro）^{24, 25）}

アジルサルタンのAT₁受容体結合作用は化合物洗浄後も持続しており、［¹²⁵I］−Sar¹−Ile⁸−AⅡ結合に対する薬物存在下でのIC₅₀値2.6nmol/Lと洗浄5時間後に得られたIC₅₀値はアジルサルタンで3倍であった。

［試験方法］

ヒトAT₁受容体に対するアジルサルタンの阻害作用はwell当たり4.4fmolesの受容体を含むヒトAT₁受容体発現細胞膜をコーティングしたマイクロプレートを用いて行った。ヒトAT₁受容体発現細胞膜は種々の濃度の薬物を含むアッセイ緩衝液（50mmol/L Tris−HCl、5mmol/L MgCl₂、1mmol/L EDTA、0.005%CHAPS、pH7.4）で室温にて90分間インキュベートした。その後［¹²⁵I］−Sar¹−Ile⁸−AⅡ（最終濃度0.6nmol/L）を添加し、さらに300分間室温でインキュベートした。洗浄実験においては、90分間インキュベートした後、アッセイ緩衝液で2回細胞膜を洗浄し、その後［¹²⁵I］−Sar¹−Ile⁸−AⅡ（最終濃度0.6nmol/L）を添加して300分間室温でインキュベートした。細胞膜に結合した放射活性はマイクロプレート用シンチレーションカウンターで計測した。非特異的結合は10μmol/LのAⅡ存在下での放射活性から求め、特異的結合は総放射活性から非特異的結合を差し引いて求めた。

（3）ウサギ大動脈標本のAⅡ収縮に対する抑制作用（in vitro）^26）

アジルサルタン（0.03、0.1、0.3及び1nmol/L）添加によるAⅡの最大収縮反応率は以下のとおりであった。また、アジルサルタン10μmol/Lにおける他の血管収縮物質（KCl、NE、5−T及びPGF_2α）に対する阻害率は以下のとおりであり、AⅡ収縮に選択的な抑制作用を示すと考えられた。

［試験方法］

摘出したウサギ胸部大動脈の螺旋状標本を用いて、マグヌス法によりAⅡ収縮の濃度反応曲線を得た。標本を繰り返し洗浄した後にアジルサルタンを添加して90分間インキュベートした後、薬物存在下でのAⅡに対する収縮反応の濃度依存性を検討した。
アジルサルタンの選択性（KCl、NE、5−HT、PGF_2α）を検討する実験では、アジルサルタンを30分間処置し、血管作動性物質による収縮反応を測定し、アジルサルタンによる抑制作用を薬物投与前後の収縮反応より算出した。

（4）高血圧自然発症ラット（SHR）における降圧作用

1）単回経口投与^27）

アジルサルタン（0.15及び0.5mg/kg）は反射性頻脈を生じることなく、投与6、8、24時間後に有意な降圧作用を示した。

［試験方法］

雄性SHR（SLC SHR/Izm、32及び39週齢）を使用した。ポリグラフに接続した腹部大動脈留置カテーテルを介して血圧を観血的に測定した。血圧が安定した時点で薬物を単回経口投与して、24時間血圧の変化を測定した。心拍数は脈波の変化から計測した。

2）反復経口投与^28）

アジルサルタン1mg/kg群では投与開始7日目、14日目に24時間にわたり有意な降圧作用を示した。また、反復経口投与による作用の減弱及び投薬中止後のリバウンド現象は認められなかった。

［試験方法］

雄性SHR（SHR/Izm、30週齢）に薬物を1日1回2週間反復経口投与した。投与前、投与後5時間及び24時間の血圧を1、7及び14日目に尾動脈よりtail−cuff法を用いて非観血的に測定した。さらに休薬2、7及び14日目に血圧及び心拍数の測定を実施した。

（5）腎血管性高血圧イヌにおける降圧作用^29）

アジルサルタン（0.03、0.3及び3mg/kg）の降圧作用は以下のとおりであった。

［試験方法］

雄性ビーグル犬（17～20ヵ月齢）を使用し、左腎動脈狭窄の作製5～8週後に試験を行った。収縮期血圧及び心拍数は薬物投与前、投与1、3、5、7及び24時間後に右前腕部より非観血的に測定した（クロスオーバーデザイン）。

（6）ラットにおけるAⅡ昇圧抑制作用^30）

アジルサルタン（0.05、0.15及び0.5mg/kg）によるAⅡ昇圧抑制作用は以下のとおりであった。

［試験方法］

雄性ウィスターラット（11週齢）を使用し、ポリグラフに接続した大腿動脈カテーテルを介して血圧を測定した。薬物経口投与1、3、5、7及び24時間後にAⅡ（100ng/kg）を静脈内より投与して血圧上昇を測定し、各時点で薬物投与前値からの抑制率を算出した。

（7）参考情報：高血圧自然発症ラット（SHR）におけるインスリン感受性への影響^31）

アジルサルタンを反復投与することによるインスリン感受性に及ぼす影響は以下のとおりであった。

［試験方法］

雄性SHR（SHR/Izm、22～24週齢）を用い、アジルサルタンあるいはオルメサルタン メドキソミルを1日1回2週間反復経口投与した。最終投与後一晩絶食し、グルコースクランプ法によるインスリン感受性測定を行った。グルコース注入開始50分後から90分後までの40分間のグルコース注入速度の平均値を算出し、インスリン感受性の指標（M値）とした。

14）	アジルサルタンの薬物動態試験（反復投与）（社内資料、承認審査時評価資料）
23）	アジルサルタンの臨床薬理試験（社内資料、承認審査時評価資料）
24）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（in vitro）（社内資料、承認審査時評価資料）
25）	Ojima M, et al.: J Pharmacol Exp Ther. 2011; 336（3）: 801
26）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（in vitro）（社内資料、承認審査時評価資料）
27）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（SHR、単回投与）（社内資料、承認審査時評価資料）
28）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（SHR、反復投与）（社内資料、承認審査時評価資料）
29）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（腎血管性高血圧イヌ）（社内資料、承認審査時評価資料）
30）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（ラット）（社内資料、承認審査時評価資料）
31）	アジルサルタンの非臨床薬理試験（SHR）（社内資料、承認審査時評価資料））

禁忌を含む使用上の注意等は「電子添文」をご参照ください。